Занятие 4
Тема: Дополнительные и лабораторные гинекологические исследования
Цель: Ознакомиться с
дополнительными (пертубация, хромогидротубация)
и лабораторными методами гинекологических исследований
План: 1. Методика
проведения пертубации и хромогидротубации. Биопсии
и микроскопии эндометрия.
2 Лабораторные
исследования.
3. Классификация
бесплодия.
Литература: 1. Шипилов
В.С., Зверева Г.В., Родин И.И., Никитин В.Я.
Практикум по акушерству, гинекологии и искусственному осеменению сельскохозяйственных
животных М., Агропромиздат,1988 г., стр.281 – 292.
При определении состояния
полового аппарата следует иметь в виду, что возраст самок, условия кормления и содержания откладывают
отпечаток на изменения матки и яичников как при
беременности, так и бесплодии самок. Кроме того, нередко заболевания полового
аппарата протекают при неясных клинических признаках. Поэтому при
гинекологической диспансеризации коров и тёлок рекомендуется использовать более
точные методы исследования клинического и лабораторного направления, так как
при вагинальном и ректальном исследовании не всегда удаётся уловить наличие патологического
процесса в органах размножения. Такие дополнительные анализы не
только облегчают постановку диагноза, но и дают ценные сведения для прогноза и
выбора способа терапии.
Так, для диагностики
заболеваний яйцеводов в настоящее время предложена методика пертубации и
хромогидротубации и их сочетание: применение
этих методик имеет не только диагностическое, но и лечебное значение, так как
вводимый в яйцеводы воздух выталкивает скопившуюся слизь, которая нередко может
быть в яйцеводах и нарушает функциональное состояние
яичников. Применение при хромогидротубации
специальной жидкости, содержащей метиленовую синьку, новокаин и
антибиотики, положительно действует при воспалительных процессах в фаллопиевых
трубах. Однако наша промышленность не выпускает аппаратов для проведения пертубации и хромогидротубации, а
поэтому ветеринарный врач должен организовать производство такого аппарата на месте. Наиболее простым аппаратом для пертубации у коров следует считать аппарат В.И. Шницара. Аппарат стоит из манометра, шаров Ричардсона,
катетера, на котором укреплён обтуратор для плотного закрытия шейки матки.
После введения катетера в канал шейки матки постепенно нагнетают воздух в матку
с помощью шаров Ричардсона, наблюдая всё время за стрелкой манометра. Доведя давление до
Кроме того, необходимо
помнить, что эти процедуры можно проводить только у коров и тёлок, у которых
исключены воспалительные процессы полового аппарата и при строгом соблюдении
показателя давления.
Биопсия эндометрия является важны диагностическим приёмом, позволяющим
установить бесплодие, обусловленное
патологическими изменениями в матке самок и протекающее без ясных
клинических признаков. Сочетание биопсии эндометрия с гистологическим
исследованием биопсийного материала особенно
целесообразно проводить у коров и тёлок, у которых половые циклы протекают
регулярно и которых многократно осеменяют.
Лабораторные исследования. Включают: бактериологическое исследование
экссудата из влагалища и матки, клеточного состава цервикально-вагинальной
слизи, проведение проб для диагностики атонии и гипотонии матки, эндометритов и
др.
Бактериологическое
исследование проводят для выявления в экссудате половых органов возбудителя
трихомоноза, вибриоза, а также условно патогенных
микроорганизмов и грибов согласно существующим положениям с учётом особенностей
роста того или иного микроорганизма или гриба на питательных средах.
Исследование цервикально-вагинальной
слизи
Готовят мазки-отпечатки и
окрашивают по Романовскому-Гимза.
В мазке подсчитывают эпителиальные клетки большие (Б), средние (С), малые (М),
безъядерные (Бя), деформированные (Дф), а наличие форменных элементов крови и слизи отмечают знаками + или – (обилие +++,
умеренное количество ++, незначительное количество + и отсутствие -). В мазке подсчитывается 500 клеток.
Клеточный состав цервикально-вагинальной слизи у коров
Фазы течки |
Б |
С |
М |
Бя |
Дф |
Предтечка |
36-61 |
18-35 |
8-37 |
до 6 |
- |
Течка |
63-70 |
20-37 |
6-22 |
до 6 |
- |
Послетечковая |
45-66 |
20-37 |
9-21 |
2-4 |
- |
Фаза уравновешивания |
2-12 |
9-20 |
71-78 |
нет |
- |
При остром эндометрите в мазке
превалируют средние клетки и появляются деформированные, при хроническом
катаральном эндометрите содержится до 6% безъядерных и до 55% больших клеток,
от 1 до 6 % деформированных при наличии небольшого количества клеток среднего
размера. При фолликулярных кистах яичников количество средних эпителиальных
клеток доходит до 43-69%, тогда как больших и малых бывает сравнительно мало, а
безъядерные полностью отсутствуют. При касте жёлтого
тела и персистентном жёлтом теле наступает резкий
сдвиг картины мазков вправо.
Проба осаждения для диагностики эндометритов (И.С.Нагорный,
Г.Н. Калиновский)
В пробирку
наливают 2 мл лохий и добавляют 2 мл 1%-ного раствора
уксусной кислоты или раствора этакридина лактата (риванола) 1:1000. При нормальном течении
послеродового периода образуется сгусток муцина, не
разбивающийся при встряхивании и осаждающаяся жидкость остаётся
прозрачной. При острых послеродовых эндометритах образуется осадок, и при
лёгком встряхивании пробирки жидкость мутнеет.
Проба Катеринова на инволюцию матки. В пробирку
наливают 3-5 мл дистиллированной воды и добавляют слизь из шейки матки
величиной с горошину. Смесь кипятят 1-2 мин. При законченной инволюции матки жидкость
остаётся прозрачной, а при субинволюции остаётся
мутной с хлопьями.
Реакция (РН) цервикальной слизи определяют с помощью РН-метра. При этом наиболее объективные данные получают при
измерении рН слизи непосредственно в шейке матки
коровы, что легко достигается во время стадии возбуждения. С помощью удлинителя
через вагинальное зеркало электрод рН-метра вводят в
канал шейки матки, не прикасаясь к её стенкам. У стельных коров электрод прикладывают
к слизистой пробке шейки матки. Нормальными показателями рН
являются 7,1-7,8.
Эксперсс-метод диагностики гипотонии матки и
эндометритов у коров (по В.С. Дюденко). Метод основан на повышении
содержания в лохиях и эстральной
слизи индикана при нарушении сократительной способности матки и наличии
токсических веществ ароматического ряда (индол, скатол и др.) при эндометритах.
Руку в полиэтиленовой перчатке
вводят во влагалище, берут лохи или слизь около шейки матки и помещают в
баночку или пробирку, на которых пишут номер и кличку коровы. Исследование
материала проводят обычно сразу. Его можно также хранить в прохладном месте 2-3
часа. Лохи берут у коров на 5-6 день после осложнённых родов, эстральную слизь в стадии возбуждения у коров, которые
неоднократно осеменялись. В пробирку наливают
5 мл лохий и добавляют 5 мл 20%-ного раствора
трихлоруксусной кислоты, смешивают и оставляют на 3-4 минуты, а затем фильтруют
через бумажный фильтр. В центрифужную пробирку
помещают 4 мл фильтрата, добавляют 1 мл 5%-ного раствора тимола, перемешивают,
добавляют 6 мл специального реактива и оставляют на 1 час. Потом в эту же
пробирку приливают 1 мл смеси хлороформ - этилового спирта, перемешивают и
центрифугируют 5 ин при скорости 1-2 тыс. об/мин.
Оценка реакции:
А) прозрачный хлороформ /-/ - сокращение
матки в пределах нормы;
Б) светло-розовый
/+/ -
незначительное нарушение сократительной функции матки;
В) розовый цвет /++/ - гипотония матки;
Г) розово-фиолетовый цвет
/+++/ - гипотония матки или атония матки;
Д) фиолетовый цвет хлороформа /++++/ - атония матки.
Для диагностики эндометритов в пробирку помещают 2 мл лохий или эстральной слизи,
добавляют 2 мл 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, смешивают стеклянной
палочкой и фильтруют через бумажный фильтр.
К 2 мл фильтрата
добавляют 0,5 мл азотной кислоты и осторожно кипятят 1 мин. После охлаждения к
смеси приливают 1,5 мл 33%-ного раствора едкого натрия.
Оценка реакции:
А) прозрачный раствор /-/ - отсутствие
воспаления матки;
Б) раствор прозрачный с
незначительным зеленоватым оттенком /+/
- слабое воспаление матки;
В) желтовато-зелёный цвет
раствора /++/ - легко протекающий катаральный
эндометрит;
Г) янтарный цвет
/+++/ - тяжёлая форма катарального
эндометрита; Д) оранжевый цвет раствора /++++/ - гнойно – катаральный эндометрит.
Биохимический анализ
сыворотки крови включает определение каротина, общего белка и кальция, неорганического
фосфора, а также определение резервной щелочности по методикам, описанным в
специальных инструкциях и рекомендациях.
Морфологический анализ
крови, определение содержания в ей
эритроцитов, гемоглобина и лейкоцитов, а также анализ мочи проводят по общепринятым
методикам.
Генетические
исследования проводят с использованием методов генетико – математического
анализы. При этом учитывают такие показатели воспроизводительной функции по
коровам и их дочерям, матерям и дочерям используемых быков: индекс осеменения и
оплодотворяемость, продолжительность беременности и периода между отёлами, частоту абортов, патологии
родов, кисты яичников и многоплодие. При оценке плодовитости быков также
устанавливают влияние наследственности
на объём эякулята, концентрацию спермы, активность и
выживаемость спермиев.
Показатель пожизненной
воспроизводительной способности (ППВС) вычисляют по формуле Уил
–Кокса:
ППВС = n
- 1 х 365/ Д х 100
где n – число телят;
Д – число дней между
первым и вторым отёлом.
Цитологический
экспресс-метод диагностики фримартинизма крупного
рогатого скота основан на появлении в тканях костного мозга тёлок – фримартинов клеток мужского типа (метод описан И.Д.Гольдман,
И.К. Живалёвым и Н.Н. Кузиной). Пунктат
костного мозга (0,5-1,5 мл)
помещают в центрифужную пробирку с 0,5 мл
среды 199, 0,25 мл 0,004%-ным раствором
колхицина и несколькими крупинками порошка гепарина. Пробирку герметически
закрывают и 30-40 минут выдерживают в термостате при температуре 37° С.
Затем 10 мин центрифугируют при 100-1200 об/мин. При этом отделяется
питательная среда, и клетки костного мозга ресуспендируют
в 5,0 мл 0,7%-ного раствора основного цитрата натрия при температуре 37° С в
течение 30 минут. Повторным центрифугированием
удаляют гипотонический раствор. Клетки
на 30 мин помещают в 5 мл охлаждённой до температуры 4° С
смеси, состоящей из трёх частей абсолютного метилового спирта и одной части
ледяной уксусной кислоты. Фиксатор удаляют центрифугированием и в таком же объёме заменяют 40%-ной уксусной
кислотой. После 10 минутной экспозиции центрифугированием концентрируют клетки
и ресуспендируют их в 0,5-1,0 мл новой порции 45%-ной
уксусной кислоты. Из этой суспензии готовят препараты хромосом – на подогретое
до 50-60° С предметное стекло наносят 2-3 капли
суспензии клеток костного мозга, которые равномерно распределяют на поверхности
стекла при его лёгком покачивании. После подсушивания в струе тёплого воздуха
препараты окрашивают по Романовскому – Гимза. Кариотип крупного рогатого скота состоит из 60
хромосом, среди которых 58 аутосом аутоцентрического типа и две субцентрического
типа половые хромосомы – большая - Х и маленькая –у.
Гинекологическая
диспансеризация позволяет установить ту или иную форму бесплодия.